Author: Artem
Company: Nato

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1996
 
Проф. Л. Н. Тарасова, канд. мед. наук Е. Н. Горскова, проф. С. Н. Теплова, Е. Н. Севостьянов
Особенности иммунитета у больных кератоконусом
Кафедра офтальмологии (зав. — проф. Л. Н. Тарасова) Уральского института усовершенствования врачей, Челябинск
Отсутствие точных сведений относительно этиологии и патогенеза кератоконуса стимулирует развитие различных направлений в изучении данной патологии органа зрения. Если в предыдущие десятилетия ведущими методами в изучении проблемы были клинические, то в последние годы предприняты биохимические, точные электронно-микроскопические, гистохимические исследования, в значительной степени определившие прогресс в сфере изучения этиологии и патогенеза кератоконуса, методов его диагностики и лечения [1, 2, 4—6]. До последнего времени иммунологические методы в изучении заболевания не получили широкого распространения.
Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей клеточного и гуморального звеньев иммунитета у больных кератоконусом.
Материал и методы. Комплексное иммунологическое исследование проводилось у 46 больных (84 глаза) кератоконусом в возрасте от 14 до 49 лет. В возрасте от 14 до 20 лет было 20 (43,5%) человек, от 21 года до 29 лет — 18 (39,2%), от 30 до 39 лет — 6 (13%); 40 лет и старше — 2 (4,3%) пациентов. Средний возраст 23,6 ± 7,9 года.
Двусторонний процесс был у 34 (73,9%) больных, односторонний — у 12 (26,1%). Кератоконус начальной стадии наблюдался на 20 (23,8%) глазах, развитой — на 40 (47,6%) глазах, далеко зашедшей — на 20 (23,8%) глазах, терминальной — на 4 (4,8%) глазах. Острота зрения без коррекции от 0,01 до 0,05 установлена в 13 глазах, 0,06—0,1 — в 36 глазах, 0,2—0,6 — в 35 глазах. Контрольную группу составили 38 клинически здоровых лиц молодого возраста.
При иммунологическом исследовании был использован комплекс следующих методов: реакция Манчини — для определения концентрации сывороточных иммуноглобулинов, определение активности комплемента по 50% гемолизу и компонентов комплемента СЗ и С4 турбидиметрическим методом на протеиновом анализаторе „Орион-Диагностика" (Финляндия), ПЭГ - преципитация для определения циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), определение количества Т – лимфоцитов и их субпопуляций методами розеткообразования — Е-РОК, ранних РОК (р - РОК), восстановленных РОК (в - РОК), определение активности лизоцима сыворотки крови нефелометрическим методом по О. В. Бухарину.
Таблица 1
Показатели клеточного иммунитета периферической крови при кератоконусе
Группа обследованных | Статистический показатель | Т - лимфоциты, %

Больные кератоконусом
(n = 46)

М ± m

44,5 ± 1,3

25,6 ± 0,9

12,3 ± 0,7

2,1 ± 0,2

| ± σ | 1,4 | 6,3 | 4.6 | 1,4
Доноры (n = 38) | М ± m | 52,7 ± 0,5 | 30,7 ± 0,9 | 25,9 ± 0,6 | 1,5 ± 0,3
| ± σ | 3,1 | 1,7 | 3,9 | 1,5
| p | <0,05 | <0,01 | <0,001 | <0,05

Примечание. Т_х — Т-хелперы, Т_с — Т- супрессоры.

Результаты исследования обработаны статистически с использованием критерия Стьюдента.
Результаты определения относительного содержания Т-лимфоцитов, р-РОК и в-РОК представлены в табл. 1.
Установлено, что при нормальном содержании лейкоцитов периферической крови, составившем в среднем 6480 ± 0,44 клетки на 1 мл, и при нормальном содержании лимфоцитов (29,4 ± 7,0%) распределение Т-лимфоцитов периферической крови у больных кератоконусом отличалось от распределения у доноров. Процентное содержание Е-РОК лимфоцитов (Т-лимфоцитов) у больных было существенно (р < 0,05) ниже, чем у доноров, — 44,5 ± 1,3 и 52,7 ± 0,5 соответственно; более низким было относительное содержание р-РОК (р < 0,05) и в-РОК (р < 0,001). Особенно выраженным оказалось снижение относительного количества в-РОК — 12,3 ± 0,7%, которое было в 2 раза ниже уровня нормы. Вследствие этого хелперно-супрессорный потенциал оказался достоверно (р < 0,05) более высоким, чем в контрольной группе, — 1,5 ± 0,3.
Все эти изменения — снижение общего числа Т-лимфоцитов и отдельных популяций РОК, увеличение их соотношения (р-РОК и в-РОК) — могут отражать нарушение лимфопоэза в условиях кератоконуса либо перераспределение клеток и изменение регуляторного потенциала лимфоидных клеток у больных с данным заболеванием.
Анализ показателей, характеризующих гуморальное звено иммунитета (табл. 2), выявил, что относительное содержание в крови В-лимфоцитов у больных кератоконусом не отличается от такового у доноров. Наряду с этим происходит снижение (р < 0,01) концентрации сывороточных иммуноглобулинов класса А, увеличение (p < 0,01) содержания в циркулирующей уровней иммуноглобулинов класса М.
Таблица 2
Показатели гуморального иммунитета при кератоконусе

Группа
обследованных

Статист. показатель

В лимфоциты

Иммуноглобулины

ЦИК

Комплемент

| | | А | G | М | | общий | СЗ | С4

Больные кератоконусом
(n = 46)

М ± m

12,6 ± 0,3

1,51±0,04

12,7±0,19

1,6 ± 0,1

51,9 ± 1,4

50,8±1,07

0,77±0,06

0,37 ± 0,02

| ± σ | 1,9 | 0,31 | 1,24 | 0,35 | 1,35 | 6,98 | 0,43 | 0,16

Доноры
(n = 38)

М ± m

13,5 ± 1,2

2,15±0,1

12,5±0,22

1,4 ± 0,03

40,8 ± 2,5

65,9 ± 2,8

0,04±0,002

0,09 ± 0,02

| ± σ | 7,4 | 0,61 | 1,35 | 0,18 | 15,4 | 15,4 | 0,01 | 0,12
| p | >0,05 | <0,01 | >0,05 | <0,01 | <0,01 | <0,01 | <0,01 | <0,01

Повышение концентрации иммуноглобулина М, типичного для первичного иммунного ответа, может отражать поступление „новых" антигенов в кровоток и первичную стимуляцию клонов лимфоцитов, способных продуцировать антитела.
Об увеличении антигенемии при кератоконусе косвенно может свидетельствовать достоверный прирост (р < 0,01) ЦИК, образующихся, как известно, из антигенов, антител и компонентов комплемента.
Общая гемолитическая активность комплемента в сыворотке крови больных кератоконусом оказалась существенно (р < 0,01) ниже, чем у доноров, — 50,8 ± 1,07 и 65,9 ± 2,8 соответственно. Напротив, содержание одного из начальных компонентов комплемента С4 (0,77 ± 0,6) и центрального СЗ (0,37 ± 0,02) было резко повышено (р < 0,01), что отражает нарушение гомеостаза в комплементарной системе.
Оценка функциональной активности фагоцитирующих клеток и активности лизоцима периферической крови у больных кератоконусом показала (табл. 3), что при этой патологии имеет место высокая поглотительная функциональная активность нейтрофилов периферической крови, о чем свидетельствует достоверное (р < 0,05) увеличение НСТ- и поглотительной фагоцитарной активности полиморфноядерных лейкоцитов по сравнению с этим показателем в группе доноров.
Показатель активности сывороточного лизоцима, клеточным источником которого в организме являются полиморфноядерные лейкоциты и макрофаги [3], оказался при кератоконусе значительно (p< 0,001) ниже, чем у доноров, — 16,4 ± 0,85 и 28,6 ± 0,07 соответственно. Следовательно, повышение процента НСТ - позитивных клеток в циркуляции, а также снижение активности лизоцима сыворотки в совокупности могут отражать нарушение гомеостаза в системе фагоцитирующих клеток и вероятность диссоциации их метаболических, фагоцитирующих и секреторных функций при кератоконусе.

Таблица 3
Показатели активности фагоцитирующих клеток и сывороточного лизоцима у больных кератоконусом
Группа обследованных | Статистический показатель | НСТ- тест | Активность фагоцитоза | Активность лизоцима
| | % | усл. ед. | % | усл. ед. |

Больные кератоконусом
(n = 46)

М± т

38,5 ± 1,22

1,33 ± 0,02

53,1 ± 1,08

194,4 ± 6,3

16,4 ± 0,85

| ± σ | 7,94 | 0,17 | 7,0 | 40,4 | 5,57

Доноры
(п = 38)

М± т

26,0 ± 9,73

1,32 ± 0,03

43,0 ± 8,1

135,0 ± 3,8

28,6 ± 0,07

| ± σ | 9,73 | 0,36 | 49,9 | 23,4 | 0,43
| p | <0,01 | >0,05 | >0,05 | <0,01 | <0,001
Выводы.
 1. В обследуемой группе больных кератоконусом преобладали лица молодого возраста (средний возраст 23,6 года), двусторонний процесс выявлен в 73,9% наблюдений, начальная стадия — у 23,8% больных, развитая — у 47,6%, далеко зашедшая — у 23,8%, терминальная — у 4,8% больных.
2. При кератоконусе выявлены нарушения иммунного гомеостаза, характеризующиеся снижением относительного содержания Т-лимфоцитов и изменением их субпопуляционного соотношения, общей активности комплемента и сывороточного лизоцима, повышением уровня иммуноглобулинов А и М, циркулирующих иммунных комплексов, СЗ- и С4-компонентов комплемента, НСТ- позитивных клеток.
3. Выявленные изменения иммунного гомеостаза на системном уровне могут быть полезным в определении характера течения заболевания и служить патогенетическим обоснованием для последующей разработки и применения иммуномодулирующих средств в комплексной терапии кератоконуса.

ЛИТЕРАТУРА

1. Краснов М. М., Зиангирова Г. Г., Каспаров А. А. и др. // Вестн. офтальмол. — 1993. — № 1. — С. 10—11.
2. Львов К. М., Дорошко Л. В., Каличава Г. С. и др. // Биофизика. - 1989. - Т. 34, № 3. - С. 478-480.
3. Маянскчй А. Н., Маянский Д. Н.  Очерки о нейтрофиле и макрофаге. — Новосибирск, 1989.
4. Пучковская Н. А., Титаренко 3. Д.  Кератоконус. — Кишинев, 1990.
5. Behrens-Baumann W. // Ophthalmology. — 1994. — Vol. 101, N 5. - Р. 794-795.
6. Bron A. J. // Cornea. — 1988. - Vol. 163, N 7. — Р. 163—167.

Поступила 04.01.96
Отсканирована для сайта Кератоконус 18.12.2000

L. N. Tarasova, Ye. N. Gorskova, S. N. Teplova, Ye. N. Sevostyanov
 THE IMMUNITY OF PATIENTS WITH KERATOCONUS
Cellular and humoral immunity parameters were studied in patients with keratoconus at different stages, aged 14 to 49 years. The results showed the immune homeostasis to be impaired in patients with local involvement of the cornea. At a total system's level the patients developed shifts in the relative content of T-lymphocytes and their subpopulations, dysimmunoglubulinemia with increased levels of immunoglobulins of the primary immune response in the blood serum, high levels of the CЗ and C4 components with a reduction of the total hemolytic activity of the complement, increased levels of NBT-positive and phagocytic cells, and a decrease of the activity of serum lysozyme.